疾病的實(shí)驗(yàn)探究已逐漸深入到細(xì)胞和基因水平中;在疾病的實(shí)驗(yàn)探究過程中,單細(xì)胞懸液制備尤為重要,它可助力于對單個細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能及基因表達(dá)等的深入了解,揭示生命活動分子機(jī)制。
那對于類器官培養(yǎng)前處理-肺該如何進(jìn)行單細(xì)胞懸液制備呢?
實(shí)驗(yàn)案例:
1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模喝?shí)驗(yàn)室模型小鼠肺組織制備單細(xì)胞懸液,進(jìn)行類器官培養(yǎng),展開藥物篩選研究。
2.實(shí)驗(yàn)樣品:模型小鼠一只
3.實(shí)驗(yàn)耗材:消化酶、終止液、移液槍槍頭、臺盼藍(lán)染料
4.實(shí)驗(yàn)設(shè)備:單細(xì)胞懸液制備儀JX-CKSM-6WK
小鼠肺組織單細(xì)胞懸液制備的實(shí)驗(yàn)步驟:
1.打開儀器電源,點(diǎn)擊管架加熱和模塊加熱;消化酶和終止液冷水解凍
2.小鼠呼吸麻醉后,解剖取出肺組織,預(yù)冷PBS沖洗血水
3.用眼科剪剪取組織樣本,放置于加滿消化液的消化管
4.先放置于管架中預(yù)熱幾分鐘,然后轉(zhuǎn)移至運(yùn)行模塊中,關(guān)閉儀器蓋子,選擇對應(yīng)程序,運(yùn)行結(jié)束,取出消化管
5.組織塊消化成渾濁的細(xì)胞懸液,用70μm的濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,加入終止液終止消化,離心,重懸,后續(xù)可進(jìn)行類器官培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)圖片:
小鼠肺組織單細(xì)胞懸液制備的實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
用臺盼藍(lán)染色,上細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行得率和活率的分析
肺組織單細(xì)胞懸液的活率為93%
單細(xì)胞懸液制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代單細(xì)胞細(xì)胞懸液制備設(shè)備,應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn),具有起始組織量小,時間短,細(xì)胞得率高,細(xì)胞活性高的特點(diǎn)。采用國際DIN方法設(shè)計(jì),低噪音,使用方便,性能穩(wěn)定,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。