近日,應(yīng)河南某附屬醫(yī)院客戶的實驗需要,選用上海凈信單細胞懸液制備儀6通道設(shè)備對人源化模型小鼠肝臟組織樣品的原代細胞提取做流式實驗,以便后續(xù)對組織樣品的實驗檢測指標(biāo)在細胞水平的表達。
實驗前處理設(shè)備:單細胞懸液制備儀6通道
小鼠肝臟組織樣品前處理懸液制備的實驗步驟:
1.儀器準(zhǔn)備:需要提前準(zhǔn)備好單細胞制備儀器;將組織消化液終止液保存于-20℃,提前取出冷水解凍備用;再打開儀器電源,設(shè)置37℃管架加熱和模塊加熱
2.樣品準(zhǔn)備:客戶小鼠解剖取出肝臟組織,生理鹽水洗凈血水
3.實驗制備操作步驟:使用眼科剪將樣品組織剪碎成1mm左右的小塊,放置于樣品管中,再加入組織消化液擰緊(加滿避免氣泡);先放置于儀器管架中37℃預(yù)熱幾分鐘,然后將其轉(zhuǎn)移至運行模塊中,合上儀器蓋;根據(jù)樣品實驗需求對其儀器運行程序參數(shù)進行調(diào)節(jié)設(shè)置,啟動儀器
4.儀器程序運行結(jié)束后,即可取出樣品管觀察組織塊,這時會發(fā)現(xiàn)組織塊已經(jīng)幾乎全部消化成渾濁的細胞懸液,再用濾網(wǎng)過濾細胞,加入終止液終止消化,然后進行離心,取出離心后的樣品管,然后棄上清即為我們所需的單細胞,加入PBS用于后續(xù)的流式標(biāo)記檢測
5.實驗結(jié)果:樣品組織塊消化效果完好,細胞量充足,符合客戶需要
小鼠肝臟組織樣品前處理懸液制備實驗效果:
單細胞懸液制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代單細胞細胞懸液制備設(shè)備,可用于流式細胞術(shù)/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗;實驗設(shè)備具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高的特點,儀器使用方便,性能穩(wěn)定,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。