單細胞高通量液滴測序Drop-seq技術(shù)是一種可快速分析數(shù)千個單細胞的方法。通過此測序方法是能夠?qū)⒚總€細胞包裹在納升級的微滴中，進行RNA雜交并產(chǎn)生MRNA轉(zhuǎn)錄，可進一步分析MRNA轉(zhuǎn)錄的起源細胞。

　　單細胞高通量液滴測序過程

　　1、準備材料　　

　　把細胞從樣品組織中分離出來，制備細胞懸浮液，制備微珠懸浮液帶分子條形碼。

　　2、微滴制備　　

　　把細胞懸浮液和微珠懸浮液泵入芯片，然后與油匯合形成單獨分散的微滴，用每個微珠將每個細胞包裹在同一個微滴中。

　　3、RNA雜交　

　　細胞組織在微滴中裂解，釋放mRNA，細胞在微珠上與分子條碼雜交。

　　4、逆轉(zhuǎn)錄　　

　　為了形成mRNA逆轉(zhuǎn)錄物(STAMPS)，裂解微滴，釋放mRNA雜交物，開始逆轉(zhuǎn)錄。

　　5、PCR擴增　　

　　在核酸外切酶的作用下，切斷每個MRNA逆轉(zhuǎn)錄物，并通過PCR擴展核酸，以擴大基因信息。

　　6、測序分析　　

　　采用各種生物信息學工具來對細胞生物進行測序分析。

　　液滴微流控是可快速分離微體積中的樣本，可實現(xiàn)數(shù)千上萬個細胞的平行高通量分析，通常每秒可產(chǎn)生1000個微滴，每個微滴體積為1nl；此外，在液滴微流控實驗過程中是不需要使用流熒光細胞儀等實驗儀器，實驗操作簡單、快速、便捷。

　　上述便是采用單細胞高通量液滴測序Drop-seq對樣本組織細胞的分離過程，將其細胞在微滴中升級，進而進行雜交轉(zhuǎn)錄，進而可分析出轉(zhuǎn)錄物的起源細胞樣本組織。